㈠ 日立7100全自動生化分析儀定標怎麼做
來源：檢驗星空
下面的內容以奧林巴斯生化分析儀為例，其他品牌生化分析儀僅供參考。
（ 1 ）問題：工作結束之後不能再次開始工作或正常關機。
原因：最常見的原因是列印機處於實時列印狀態（ Data Log List 或 Realtime Report 狀態），列印機可能缺紙、卡紙、被誤操作為暫停或關機等。
解決方法：排除列印機故障，點擊 < 儀器狀態 >< （ 6 ） DPR 狀態 > ，點擊 ，按 Resume 繼續列印，按 Cancel 取消列印操作。
（ 2 ）問題：是否每天定標就能保證結果穩定？
答：不一定，可能您在定標時並不是每天都新溶解定標液，因為定標液復溶後有一些項目不穩定，比如：TBIL 、 DBIL （見光分解）、 GLU （細菌分解）、酶項目（冰凍後復溶降解）。
解決方法：以上項目在定標時一定要新溶解一瓶定標液，至少溶解三十分鍾，在一小時內測定完成。
（ 3 ）問題：病人輸液時加入右旋糖苷影響總蛋白的結果嗎？
答：影響。右旋糖苷存在血清中可引起輕度乳糜，雙縮脲法測定總蛋白會使右旋糖苷形成沉澱及綠色化合物而導致錯誤的結果，偏高的結果最多可以達到 20 克 / 升。
（ 4 ）問題：可以用總蛋白試劑測定尿或腦脊液中的蛋白嗎？
答：不能。因為敏感度太低。應選用 OSR6170 （尿 / 腦脊液蛋白試劑盒）。
（ 5 ）問題：奧林巴斯水平 I 和水平 II 質控血清可以用在干化學的儀器上嗎？
答：不能。常規的質控血清在奧林巴斯儀器上測定時被試劑稀釋，而干化學的質控系統質控液直接加到乾片上。相對於常規質控，干化學質控中的保護劑、添加劑、穩定劑的濃度相對較高。實際上，沒有任何一種質控同時適用於干化學與濕化學。
（ 6 ）問題：可以用 CKMB 試劑盒測定 CKBB 嗎？
答：理論上可以，但提供的標本中必須不含有 CKMB ，這些可以用電泳法來檢查。
（ 7 ）問題：OSR6121 的葡萄糖試劑可以測定 CSF （腦脊液）中的葡萄糖嗎？
答：可以，因為與尿標本一樣，都，都不含有蛋白質，但是前沒有官方報道。
（ 8 ）問題：如何防止 ALT 對 LDH 的交叉污染？
答：在 ALT 試劑中加入終濃度為 5mmol/L 的 EDTA ，可以降低約 50% 的交叉污染（可降低至 14U/L 的 LDH ）。
（ 9 ）問題：EDTA 血漿影響苦味酸法的肌酐嗎？
答：影響。EDTA 抑制肌酐與苦味酸反應，使結果偏低。
（ 10 ）問題：高葡萄糖的標本影響苦味酸法的肌酐嗎？
答：苦味酸與肌反應不特異，假肌酐如：酮體、抗壞血酸鹽、丙酮酸鹽、葡萄糖和尿酸都對 Jaffe 氏反應有明顯的擾作用。通過調整 NaOH 與苦味酸的濃度，調節反應溫度與測量窗口，可以減低這些竟爭反應，奧林巴斯改良的 Jaffe 法可以做到葡萄糖濃度達到 17mmol/L 沒有干擾。
（ 11 ）問題：奧林巴斯 DBIL 直接膽紅素試劑所測定結果是否包含△膽紅素？
答：是。因為奧林巴斯 DBIL 直接膽紅素試劑帶有樣品空白，可以扣除△膽紅素的干擾。所以有用戶說結果太低，不是太低，是其它試劑的結果太高了。
（ 12 ）問題：為什麼 TP 總蛋白的試劑空白為負數？
答：在測定試劑空白時，因為當試劑 II 加入後，在副波長 660nm 的吸光度大於主波長 540nm 的吸光度。用雙波長測定，試劑空白為負數。
（ 13 ）問題：為什麼有些質控 CKMB 結果大於 CK ？
答：因為質控中有一些添加成份，可能動物組織（牛腦），此組織中含有 CKBB ，所以 CKMB 的結果大於 CK ，但不應大於 CK的二倍。
（ 14 ）問題：APOA1/APOB 是依照 IFCC 還是 CDC 標准追蹤的？
答：中國是最早是由衛生部老年病研究所根據美國疾病控制中心 CDC 引進的此項目，美國 CDC 的結果比國際衛生組織 WHO 低， APOA1 乘以 0.91 ， APOB 乘以 0.79 就與國內一致。一般歐州公司的產品都是 IFCC 標準的。
（ 15 ）問題：葡萄試劑可以測定尿標本嗎？
答：可以。建議用已糖激酶法的葡萄糖試劑。葡萄糖氧化酶法的試劑會受尿中 Vc 的干擾。
（ 16 ）問題：為什麼有時 HBDH 的結果大於 LDH ？LDH opt 與 LDH IFCC 有什麼關系？
答：從某種意義上講， HBDH 是 LDH 的一部分，但是可能由於方法學（底物、緩沖液、 PH 值等）的不同，會出現 HBDH 的結果大於 LDH ，如果 LDH 是 opt 法就沒有這種現象。LDH opt 是歐洲的方法，底物是丙酮酸。LDH IFCC 的底物是乳酸，兩者的正常值范圍相比 LDH opt 比 LDH IFCC 大約高 2.2 倍。
（ 17 ）問題：新換了一個試劑，有反應曲線、因數是正確的、方法學、讀點、波長均無問題，結果是「 0 」，為什麼？
答：在參數中 Correction Factor A 常規下是：1.0000 ，不小心被改為了 0 。
（ 18 ）問題：新換了一個廠家的肌酐試劑，重新定標後，結果均為 1500 多，是何種原因？
答：在參數中 Correction Factor B 常規下是：0.0000 ，不小心被改為了 1500 。
（ 19 ）問題：經常丟試劑，但僅限某一項目，原因是什麼？
答：最常見的原因是您沒有使用原廠的試劑瓶，國產的試劑瓶的形狀可能不規則，在取試劑的過程中試劑針碰到試劑瓶的瓶口，就會報警設有試劑。
（ 20 ）問題：給一新項目定標時，報警 ACAL incomplete ，為什麼？
答：最可能的有以下幾種原因：
① 定標液的位置不正確；
② 定標液所用的樣品杯太小、太低，不能被儀器探測到（比如有些用戶用離心管）；
③ 試劑量不足，試劑 I 或試劑 II 任何一瓶試劑小於 2ml （舊版）或低於報警測試數目（新版）；
④ 沒有定標申請而放入空白（藍）和 / 或定標（黃）架子。
（ 21 ）問題：新上了一個實驗項目，定標不通過，報 Calibration Error ，是什麼原因？
答：在定標過種中如果有任何報警，將會定標失敗：
① 在定標過程中定標液不足；（ # ）
② Rate 法的項目線性不好或范圍設置不正確；（ * ）
③ 試劑空白超出所設定的范圍或波長設定錯誤；（ Y 、 y 、 U 、 u ）
④ 在 P-B-I 定標參數中，因數范圍過窄，先報 Calibration Factor Over Range ，後報 Calibration Error 。
（ 22 ）問題：如果測定的標本特別多，如何給一個項目設定多瓶試劑？
答：奧林巴斯的生化分析儀最多可以給一個項目設定九瓶試劑：點擊 < 儀器狀態 >
< （ 0 ）試劑狀態 > ，先設一瓶試劑，再用游標選定一個空位置，點 後，選定項目、瓶子的規格，退出後，最後設定的為第一瓶試劑，以前的為第二瓶試劑，依此類推。
（ 23 ）問題：經常發現某一種試劑用的特別快，比如早上檢查有 100 個 TP 試劑，做四、五十個肝功後儀器就報警沒有試劑了，可能是什麼原因？
答：在 P-Y-A 中，最下面是 LIH Reagent Test Name ：您一定是選定的此項目，它的意義是， LIH 的測定與此項目共用一瓶試劑，但這個地方的誤選，儀器不會了生錯誤而吸此項目的試劑，在另外一個畫面 P-Y-C （ Round ）中， LIH Measure ：中默認是「 Selected 」，被不小心改成了「 ALL 」，也就是說您讓儀器每個標本都做 LIH （血清信息），用的是您所選定的試劑。
（ 24 ）問題：如何設定奧林巴斯帶樣品空白的 TBIL/DBIL ？
答：按以下六步設定實驗參數：
1 ． 首先，在 [Parameter]-[Common Test Parameter]-[Test Name] 編 TBIL 與 DBIL 的實驗名稱，然後在 91 號與 92 號編 TBILb 與 DBILb （總膽紅素與直接膽紅素的空白實驗）
2 ．其次，在 [Parameter]-[Specific Test Parameter] 中，編輯 TBIL 與 91TBILb 的參數（詳見試劑盒內的說明書）， DBIL 與 92DBILb 的參數。請注意 TBIL 與 91TBILb 的參數要完全一樣， DBIL 與 92DBILb 的參數要完全一樣。
3 ． [Parameter]-[Inter-Related Tests]-[Sample Blank] 中，選 Color Test （顏色實驗）為 TBIL 與 DBIL ， Blank Test[ 空白實驗 ] 為 91TBILb 與 DBILb 。
4 ． [Parameter]-[Calibration]-[Calibration Specific] 中，選 TBIL 與 DBIL 為 AB 定標方式， 91TBILb 與 92DBILb 為 MB 定標方式， Factor 為 1.0000 。
5 ．設試劑位：TBIL/DBIL 為紅蓋， TBILb/DBILb 為白蓋，共設定了四個試劑位。
6 ． [User]-[Calibration] 中， TBIL 與 DBIL 兩點定標， TBILb 與 DBILb 空白定標。
（ 25 ）問題：新設定一個計算實驗後，儀器不能正常工作，在退出時顯示「 LIH Reagent Test No./Calculated Test No. Miss Match 」 , 是何原因？
答：在 P-Y-A 中，最下面是 LIH Reagent Test Name ：您一定是選定的此項目，這個地方的默認為 96 ：LIH 。
（ 26 ）問題：新設定一個計算實驗後，儀器不能正常工作，在退出時顯示「 Total Sample:Item 」 , 是何原因？
答：在 P-I 中， SV （標本量） +DIL VOL （吐水量） +R1 （試劑 I ） +DIL VOL （吐水量） +R2 （試劑 II ） +DIL VOL （吐水量）；在 AU400/600/640 應在 150-550 微升之間，在 AU2700/5400 應在 120-440 微升之間。
（ 27 ） 問題：新設定一個計算實驗後，儀器不能正常工作，在退出時顯示「 R1+Dilution Volume:Item 」 , 是何原因？
答：在 P-I 中， R1 (試劑 I ) +DIL VOL （吐水量）在 AU400/600/640 應小於 300 微升, AU2700/5400 應小於 250 微升。
（ 28 ） 問題：新設定一個計算實驗後，儀器不能正常工作，在退出時顯示「 Number of Muti:Item 」 , 是何原因？
答：在 P-Q-I 的質控參數編輯中，一個項目只能有兩個「 Muti 」，表示用這兩個項目畫二維質控圖（ Twin Plot ），多了或者少了儀器都不能正常工作。
（ 29 ） 血清磷的測定有時偏高 1 倍以上，復查結果正常，為什麼？
答：交叉污染，例如儀器試劑針加完含磷酸鹽的試劑（ BG ），再加磷試劑，當沖洗不完全時造成污染。解決方法：A. 調整試驗順序，把磷項目放在前面，先測定即可避免污染. B. 利用儀器本身提供的抗交叉污染程序，通過增加沖洗次數可避免污染 。
（ 30 ）溶血、黃疸、乳糜血對臨床生化的那些項目有干擾？
答：溶血、黃疸、乳糜對臨床項目的干擾見以下表格（本結果僅供參考）
（ 31 ）測定結果後面有時出現標志 「 u 「 , 是什麼原因？
答：試劑空白的吸光度超出設定范圍。
解決方法：A 如為試劑變質，則更換試劑；B 重新調整試劑空白的吸光度范圍；C 如更換燈泡或做過保養，重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。
（ 32 ）怎麼樣判斷 K ， Na, Cl 電極膜破裂？
答：如果電極膜破裂，在 ISE 診斷中測定高值標准，底值標准和 MID 的電位值，如果三者電位值一致，沒有明顯區別。
（ 33 ） TG 測定時，質控高、低值都符合要求，病人結果偏低，為什麼？
答：可能的原因是用戶所用定標液為甘油（無色水劑），試劑中的關鍵酶（脂肪酶）量不足或者活性中夠，就會造成這種現象。
（ 34 ） ISE 定標時， SLOPE 值突然下降 10 點以上，為什麼？
答：Na,K,Cl Slope 值從 53 ， 55 ， 52 突然下降為 34,38,40. 常見原因：A. 定標液敞口放置時間過長，更換新定標液。B. 清洗混勻棒。C. 更換三通管。
（ 35 ）如何在 AU400/600/640 儀器實驗自動重做？
答：⑴ .[Parameter]-[System]-[System] 中：Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。
⑵ 在 Online 參數中：改成 Batch-None-Batch-None 。
⑶ 報警限確定（僅供參考）：見表 1 。
⑷ 重做規則以及相關實驗：[Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中設置：
Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; T
Dilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F
相關試驗：ALB—TP ；DBIL—TBIL ；CKMB—CK ；TG—LDL 。
（ 36 ）為什麼要定標？多長時間要定標一次？
答：⑴ 定標的意義：定標就是要找出一個參考點，就是一個 K 值（或 F 值）。它是由儀器與試劑狀態確定下來的。當我們測定一個標本時，無論您是用手工的方法或全自動生化分析儀，測出來的值只是一個吸光度，這個吸光度對我們沒有什麼意義，我們要把這個吸光度轉換成一個濃度或是酶的活性。那就要乘上一個 K 值，計算並列印出來的結果對我們就有意義了。K 值就是我們通過定標找出來的。一般上最低要求是有試劑空白與標准品。經過儀器測定出兩個吸光度：
標准濃度 - 試劑空白
A 標准 - A 試劑空白 （試劑空白通常是 0 ）
標准液的濃度我們是知道的，這兩個吸光度可以由儀器測出，這樣就得出一個 K 值。無論什麼樣的標本，用其吸光度乘以 K 值我們就得到了答案。因此， K 值具有非常決定性的意義，可以決定標本的准確性。
⑵ K 值的決定因素：我們看看 K 值會受到什麼影響呢？第一，標准液的濃度一定要准確（標准液最好與標本一樣是以血清為基質的）。第二，標准液的吸光度與試劑空白的吸光度一定要准確。吸光度受儀器狀況、試劑狀況的影響，如果您的儀器相當穩定，試劑是影響 K 值的一個主要因素。
⑶ 如何確定 K 值是正確的？一般我們用質控血清來檢查，最好是兩種水平的質控來檢查，如果質控結果很好，可以說 K 值是准確的，用這個 K 值計算出來病人的結果也是准確的，所以 K 值非常關鍵。
⑷ K 值的真面目：K 值實際上代表了斜率，截距代表試劑空白，試劑空白每天都在變化，所以 K 值的穩定性決定您的儀器與試劑，如果儀器與試劑都十分穩定，那 K 值也很穩定。
⑸ 多長時間定一次標合適？這要看您試劑的穩定性，質控結果不好，有些項目做試劑空白可以解決，有些項目要做兩點定標。
⑹ 酶的項目如何確定 K 值：一是計算出來的理論 K 值；
TV ′ 1000
K= ————————
SV ′ L ′ e
二是用有酶項目的定標液得出 K 值：目前 OLYMPUS 公司可以提供多項目的定標液，不僅有底物類的項目，也有酶類的項目。
（ 37 ） AU400/600/640 在編參數時有哪幾項基本點？
答：Sample vol （樣品量） ：2 ~ 50 m l , 可以按 0.5 m l 為單位增減。Dil vol. ( 稀釋液 - 吐水量 ) ：一般建議樣品量少於 5 m l 時，加 10 m l 水。
Reagent 1 vol （第一試劑量） ：25 -300 m l, 可以按 1 m l 為單位增減。Dil vol( 稀釋液 - 吐水量 ) ：一般用濃縮試劑時才用。
Reagent 2 vol （第二試劑量） ：25 -300 m l, 可以按 1 m l 為單位增減。Dil vol( 稀釋液 - 吐水量 ) ：一般用濃縮試劑時才用。第二試劑是固定的 10-11 點之間加入的。
Wavelength Pri: （主波長） Sec. （付波長）
測定波長共有十三種可以選擇：340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。
Method （方法學） 共六種 ：End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。
前三種與後三種的差別為：前三種是以試劑為空白的，後三種是以比色杯為空白的。
Reaction （反應方向） ：+ ， - 。End 與 Fixed 法不起作用，但是 Rate 法一定要輸正確。
請記住！向下反應一般來說只有三種：AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均為向上反應。
Point 1 Fst Lst
Point 2 Fst Lst
（讀點設置） Point1 為主測定， Point2 為輔助測定。
End 法：a ）單試劑：一般均為 0--27 ，特例：ALB 為 0—4 ；
b ）雙試劑（有樣品空白功能）：0—27 ；0—10 。
Rate 法：a ）單試劑：延遲時間較短的，一般輸 4—10 。
b) 延遲時間較長的，一般輸 21—27 。
Fixed 法：固定兩個點之間去計算。
a) 單試劑苦味酸法肌酐：1—4 ；尿素氮：3—8 。
b) 雙試劑苦味酸法肌酐：11—14 ；尿素氮：12—17 。
Linearity （線性） ：Fst Lst Rate 法才輸入，一般國產試劑 30% ；進口試劑：15% 。
No-Lag-Time ：Rate 法才輸入，在讀點期內，如果反應太快，超過線性（ Linearity 限）儀器會自動用線性比較好的那一段來計算。
Min OD L Max OD H （吸光度限）
Rate 法才輸入，如果 Rate 法的反應，反應速度太快，出現了底物耗盡的情況，向下的反應會低於 Min OD ，向上的反應會超過 Max OD 。
Reagent OD Limit Fst. L Fst. H
Lst. L Lst H
試劑空白 OD 限 ：Fst 指的是 0 點， Lst 指的是 27 點。只對 Rate 法有用，一般向下的反應，輸 0.9—2.5 ，向上的反應 -2.0—0.8 。
Dynamic Range L H ：指的是試劑盒的線性范圍。
ONBOARD STBLTY PERIOD 有條碼的試劑在儀器上的穩定期。
Normal Range （正常范圍） ：可以按姓別、年齡輸入正常范圍
None selected （不分性別年齡的正常值） 如果什麼都沒有選擇時的正常范圍 （ AU600 在這里輸入幾位小數，結果就保留幾位小數）
Out of Range 超出范圍
Panic Value 報警值
Unit 單位
F7 ：Decimal Places 小數位
（ 38 ） Olympus 生化分析儀可以做前帶檢查嗎？
答：可以，並且有三種檢查方式，詳見 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。Olympus 的 TG 試劑就有第一種檢查法。
（ 39 ） CKMB ﹥ CK 會出現在什麼情況？
答：國內及國外的很多報道有上述現象 , 只要 CKMB 的升高不是由於溶血造成的 ,CKMB >CK, 這樣的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系統混亂， 其中的一些免疫球蛋白充當的輔酶的作用。
（ 40 ）溶血標本可測定 CKMB 嗎？
答：通常測定 CKMB 的標本應避免溶血，在 Olympus 的試劑與儀器配合可以基本上扣除這種干擾。
RBC 中並不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般廠家會在試劑中加入抑制劑 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 來抑制 ADK 的作用 , 但抑制率僅有 95-97%, 也就是說有 3-5% 沒有被抑制 , 對於 正常的標本只升高 0-6U/L, 極端標本可能會到 35U/L, 只要應用雙速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干擾。
（ 41 ） CKMB 正常， CK 特別高可能會出現在什麼情況的病人？
答：溶血標本、肌肉損傷、外科手術後、酒精中毒、肌營養不良等。
（ 42 ） OlympusCKMB 試劑中抗 M 亞基抗體的特異性如何？
答：在 37 ℃ 下最多可以達到 4000U/L, 特異性為 99.5%, 最多可有 20U/L 的干擾。
（ 43 ） Olympus 質控或定標液中應選哪種方法的靶值？
答：以下的表格為 Olymopus 定標液及質控血清中國建議使用的方法。
（ 44 ）標本的某一項或幾項的結果是零或負數，復查後正常，其它標本的結果和質控結果均正常，可能是什麼原因？
答：最常見的原因是血清表面有氣泡。
（ 45 ）在酶項目分析中「 Serum Start 」 ( 血清啟動 ) 「 Substrate Start 」 ( 底物啟動 ) 有什麼區別？
答：通常血清啟動為單試劑，加完標本就開始反應，底物啟動一般為雙試劑，標本與第一試劑沒有反應，加完啟動試劑（第二試劑）開始反應。
（ 46 ）如何判斷水的質量？
答：此方法不一定科學，僅供參考：取一隻一次性的塑料試管，加一毫升左右的鎂（二甲苯胺蘭法）試劑，然後加一兩滴水，5 分鍾後觀察有無變成紅色，如變成紅色表明所用的水中含有離子。
（ 47 ）如何排除儀器方面的問題？
答 ：（ a ） 光路 : 在儀器上設定一個項目為終點法 , 因數為 10000 給這個項目做空白定標 . 然後 , 把樣品和試劑全部放成水 , 觀察最後的結果 , 可以接受的范圍是正負 15.
(b) 比色杯 : 奧林巴斯的儀器是做光電校正 , 日立儀器是做比色杯空白 , 不同的儀器有不同的標准 Ca,Mg 等項目對比色杯敏感。
（ 48 ）甘油三酯會發生類似免疫反應的前帶現象嗎？
答：會發生。甘油三酯的催化反應主要是基於 L- 甘油 -3 磷酸氧化酶與改良的 Trinder\''s 反應。當 TG 大於 20mmol/L 時會有一個十分強烈的干擾反應，並經常發生在一些輕微乳糜的標本。產生干擾的原因是快速利用氧，反應處於厭氧狀態， L- 甘油 -3 磷酸氧化酶與其電子受體作用使形成的顏色消退。
（ 49 ）如何判斷試劑針與攪拌棒的交叉污染？
答：以 AU400/600/640/2700 為例，這些儀器都是三頭攪拌棒：Px 為提供項目， Ra 為接受項目，做 20 個標本（混合血清），每個標本只做一個項目，按如下排列方式做：
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Px1 Ra1 Ra2 Ra3 Ra4 Px2 Ra5 Ra6 Ra7 Ra8
樣品針：Data1 REF.1 Data2 REF.2
攪拌棒：Data1 REF.1 Data2 REF.2
以同樣的方式做下一組標本，得到 Data3 、 Data4 、 REF3 、 REF4 。用以下方式研究：
100- （（ Data1/REF.1 ） *100 ）
100- （（ Data2/REF.2 ） *100 ）
100- （（ Data3/REF.3 ） *100 ）
100- （（ Data4/REF.4 ） *100 ）
（ 50 ）如何判斷比色杯的交叉污染？
答：P 為提供項目， R 為接受項目，所有標本均為混合血清。以 AU400 為例 88 個比色杯要准備 176 份標本：
P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)
以此類推，第 66 與第 88 個標本的項目均為水。在同一個 ROUND 從第 89 到 176 個標本的項
目均 R 項目，後 88 個標本均為血清，不放水。那麼第 110 、 132 、 154 、 176 號標本的結果為
參照結果（ REF ）從第 89 號到 176 號除外以上四個號碼的標本均為受到比色杯乾擾的結果。
以上的操作再重復一次。
公式：100- （（受干擾結果的平均值 / 四個對照結果的平均值） *100 ）