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怎樣用凝膠成像系統測定蛋白含量

發布時間: 2022-05-03 04:01:52

『壹』 誰能介紹下凝膠成像分析系統 西盟的怎麼樣

凝膠成像即對dna/rna/蛋白質等凝膠電泳不同染色(如eb、考馬氏亮藍、銀染、sybr green)及微孔板、平皿等非化學發光成像檢測分析。 凝膠成像系統可以應用於分子量計算,密度掃描,密度定量, PCR定量等生物工程常規研究。
編輯本段凝膠成像系統的原理
樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標准品或者其他的替代標准品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統定性的基礎。根據未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析,就可以確定它的成份和性質。 樣品對投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會有差異。光密度於樣品的濃度或者質量成線性關系。根據未知樣品的光密度,通過於已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質量。這就是圖像分析系統定量的基礎。採用最新技術的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻,最大限度的消除了光密度不均造成的對結果的影響。
編輯本段凝膠成像應用范圍
總體上來說凝膠成像可應用於:凝膠成像系統可以用於:蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析 (1)分子量定量 對於一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,並以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要准確很多。 (2)密度定量 一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟體,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標准條帶進行密度標定以後,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用於對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。 (3)密度掃描 在分子生物學和生物工程研究中,最常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟體結合現在實驗室常規配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。 (4)PCR定量 PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那麼可以利用軟體計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上並不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量並計算其占總和的百分數,密度掃描時並對選擇區域生成縱向掃描曲線圖並積分。
編輯本段凝膠成像種類
(1)普通凝膠成像分析系統:可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進行圖象採集並進行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見樣品成像); (2)化學發光成像分析系統:成像范圍涵蓋UV,EB,化學發光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像; (3)多色熒光成像分析系統:成像范圍涵蓋UV,EB,化學發光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像; (4)多功能活體成像分析系統:UV,EB,化學發光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型型動物。
編輯本段凝膠成像廠家
目前凝膠成像廠家很多,市場上常見的凝膠成像如:美國西盟國際(sim)品牌凝膠成像,日本astron,德國Royal Biotech凝膠成像等等。
編輯本段凝膠成像特點
以美國西盟國際(sim)品牌Bio-Best 140M凝膠成像 為例: 高解析度像素: 140萬、200萬、300高像素專業數字CCD攝像頭,分析圖像更清晰,解析度更高。 多種光源可選: 可由觸措鍵控制開關的四種312nmUV、254nmUV、365nmUV及白光,擴展了應用范圍。 推拉式工作台: 方便裝卸清潔,易於實驗操作,人性化設計。 獨特的風扇及密閉風道設計: 紫外工作台及主機裝備有排風風扇,主機側壁內有SIM獨家專利設計的密閉排風通道,有效降低室內溫度,最大程序減小對樣品的影響,避免測試過高使膠彌散過快。 密封設計: 可保護操作者免受漏出紫外光的輻射。 先進的暗箱技術,操作安全: 密封效果好保證了圖片的獲取和UV的傳說。
編輯本段凝膠成像一般操作步驟
1.打開凝膠成像系統開關。 2.打開電腦,打開並進入成像軟體。 ECL拍攝 將拍攝模式切換為「ECL模式」,將濾光輪轉到ECL位。選擇合適拍攝解析度(有像素合並功能的機器都有這個功能),點擊「啟動」。將樣品放置在樣品台正中間,調整鏡頭的焦距使樣品占據窗口約80%左右,,然後點擊「自動曝光」,勾掉「負片」並調整聚焦使預覽窗口中的樣品圖像清晰.(光圈越大,自動曝光所需時間越短。)並先用單幀拍攝,拍攝一張Mark照片。關閉反射白光後給放置在化學發光成像板上的硝酸纖維素膜均勻加上發光液。將拍攝方式設置為「規則積分」,勾上「負片」,並設置的時間和張數,點擊「拍攝」按鈕即可。普通凝膠拍攝 1.將拍攝模式切換為「普通模式」,將濾光輪轉到UV位(無綠光鏡輪的無需調整)。 2.選擇合適拍攝解析度(機器有像素合並功能),點擊「啟動」。 3. DNA膠拍攝:將DNA膠放置在紫外台正中間,調整焦距使樣品占據窗口約80%左右,,然後點擊「自動曝光」,並調整聚焦使預覽窗口中的樣品圖像清晰.然後關閉反射白光,開啟透射紫外,並微調,確保在紫外下處於清晰狀態。 蛋白質膠拍攝:將蛋白質膠放在拆疊白光板的中間,關閉反射白光,開啟透射白光,然後點擊「自動曝光」,並調整聚焦使預覽窗口中的樣品圖像清晰.。 4.在軟體界面點擊「拍攝」按鈕即可。

『貳』 凝膠成像分析系統採用的是什麼方法

凝膠成像分析系統用於對電泳凝膠圖像的分析研究,採用數字攝像頭將置於暗箱內的電泳凝膠在紫外光或白光照射下的影像取進計算機,
通過相應的凝膠分析軟體,可一次性完成DNA、RNA、蛋白凝膠、薄層層析板等圖像的分析,最終可得到凝膠條帶的峰值、
分子量或鹼基對數、面積、高度、位置、體積或樣品總量。

『叄』 血清蛋白質電泳所得的結果如何進行定量分析

1。直接將帶條帶的凝膠放在 凝膠呈像系統 中進行定量分析。
2。將所需要的條帶剪切下來,用X體積蒸餾水溶解,通過紫外分光光度計在280nm條件下,測定吸光度A值。根據儀器目前標准曲線計算蛋白質濃度,與蒸餾水體積X相乘,得到蛋白質質量。
3。如果樣品中含有熒光成分,可以進行熒光分析。

『肆』 怎樣用伯樂凝膠成像系統掃描western照片

伯樂凝膠成像系統在進口產品中還是不錯的,但是確實價格比較高,相比較而言可以選擇國產性價比高的,比如上海領成生物科技有限公司生產的Tocan 240凝膠成像系統,相關技術參數: 一、產品特點 1、引領國際潮流的人性化設計!工程塑料模具成型,安全、美觀、輕便; 2、防紫外彈出式觀察窗,無需電腦,觀察原始實驗結果,方便、快捷; 3、左右側雙開門的一體化割膠裝置,配合觀察窗使用,舒適、安全; 4、專業軟體系統支持的全電腦控制+觸摸控制面板雙控制體系,控制電源開關、光源控制、光圈、聚焦等觀察和拍攝工作,實現污染現場和電腦操作現場隔離,防止交叉污染,確保操作者安全; 5、抽屜式樣品載物台,方便取放樣品; 6、紫外自動防護裝置:拉出載物台取放樣品,系統自動關閉紫外光源,防止實驗者被高強度紫外光照射。特殊情況亦可暫時解除防護功能,方便箱體外部的切膠操作。 二、主要參數指標 1、高清晰度數字黑白CCD攝象頭, 有效像數:1280X1040,8bit,USB 2.0; 2、進口電動鏡頭; 3、檢測靈敏度Protein ≥0.02ng DNA ≥0.05ng; 4、多層鍍膜590nm專業鏡頭濾色裝置; 5、透射紫外波長:302nm,紫外透射濾光片面積是20X20cm; 6、白光板:兼反射、透射功能,白光板面積20*25cm。 三、Tocan凝膠成像和分析軟體 1、擁有自主知識產權的軟體;拍攝和分析功能一體化,擁有組裝機(國產硬體和進口軟體組裝)無可比擬的優化性能。 2、全自動電腦同步控制模塊:通過該軟體的面板式模塊控制電源開關、光源選擇、鏡頭焦距、景深、光圈調節; 3、圖像動態預覽,對預覽圖像的動態調節功能,圖像長時間曝光功能; 4、圖像拍攝保存時除了通用JPG、BMP外,軟體自有GAD格式,可詳細記錄圖像操作人員、操作日期、實驗材料等重要信息; 5、分析功能主要有自動蛋白分子量的計算、濃度計算、百分比組成、Excel結果輸出等功能。 網址:/

『伍』 在用凝膠成像系統時,若所檢測樣品是核酸或蛋白質時,濾光片的位置應調到

只知道凝膠成像系統用的濾光片是590和535NM的產品,位置是指什麼?

『陸』 凝膠成像系統怎麼使用

凝膠成像很簡單啊,等於就是一個相機,一個紫外透照台,一個暗室,照相用的。看說明書怎麼在電腦上照相就好了,照相機會使吧?調焦距,對焦,調光圈,要是不會用相機的請移步補一補攝影基本知識。

『柒』 如何分析蛋白膠上目的蛋白佔全軍蛋白的百分比

先用凝膠成像儀將曝光後的膠片掃描,後有專用軟體分析各條帶的光密度指標,找出目的條帶指標值,比上總條帶指標即可~
………………
詳細資料請參考:on
http://proct.bio1000.com/100726/

『捌』 凝膠成像系統的應用范圍

總體上來說凝膠成像可應用於:凝膠成像系統可以用於:蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析。
(1)分子量定量
對於一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,並以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要准確很多。
(2)密度定量
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟體,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標准條帶進行密度標定以後,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用於對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
(3)密度掃描
在分子生物學和生物工程研究中,最常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟體結合現在實驗室常規配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
(4)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那麼可以利用軟體計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上並不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量並計算其占總和的百分數,密度掃描時並對選擇區域生成縱向掃描曲線圖並積分。

『玖』 全自動凝膠成像分析系統可對哪些圖像進行分析處理

全自動凝膠成像分析系統可用於DNA/RNA凝膠、蛋白質凝膠、放射自顯影膠片、酶標板、薄層層析板等圖像的成像及分析處理,能對條帶、斑點及、其他任何目標區域進行精確地總量分析、分子量分析,聚類分析、同源性分析等。

『拾』 凝膠成像儀是做什麼用的

做凝膠用的,用在DNA 蛋白的檢測分子生物學方面,在操作凝膠成像儀之前,應完成凝膠的基因擴增(PCR儀)-電泳(電泳系統)-然後上凝膠成像儀上觀察分析、數據處理